On suppose des lectures contre le solvant, non absorbant (on règle le "zéro du spectrophotomètre" avec le solvant).
Le volume de réactif R utilisé est le même que pour les tubes d'étalonnage. Le volume final du tube essai est à la valeur Vf, la même que pour les tubes d'étalonnage. On verra que c'est fondamental.